SPR表面等离子共振是将一种生物分子(靶分子)偶联在生物传感器表面,再将含有另一种能与靶分子产生相互作用的生物分子(分析物)的溶液注入并流经传感器表面。分子间的结合引起传感器表面质量增加,导致折射指数按同样的比例增强,生物分子间反应的变化即被监测到。通过不同浓度梯度和温度梯度的分析物的注入,即可观察到分析物与靶分子的相互作用在分析物浓度或温度变化后引起的SPR角改变,进而可以绘制出两种分析物相互作用的SPR分子动力学曲线,计算出Kd 结合常数。
而ForteBio Octet Red96e生物分子相互作用分析系统,该仪器采用生物膜干涉技术(简称BLI技术)实时提供高通量的生物分子相互作用信息。仪器发射白光到传感器表面并收集反射光,不同频率的反射光谱受到生物传感器的光膜层厚度的影响,一些频率的反射光形成了相长干涉(蓝色),而另一些受到了相消干涉(红色)。这些干涉被光谱仪所检测到,并形成一幅干涉光谱,并以干涉光谱的相位位移强度(nm)显示。因此结合到传感器表面的分子一旦有数量上的增减,光谱仪变会实时地检测到干涉光谱的位移,而这种位移直接反应出传感器表面生物膜的厚度,实现对生物分子与化合物相互作用高通量、快速、实时的检测。可检测生物分子的相互作用,包括抗体及小分子药物的亲和力和动力学测定、疫苗中某种微量蛋白的滴度鉴定、蛋白与蛋白的相互作用、核酸或反义核酸与蛋白的相互作用分析等。具有无需对样品分子进行标记、灵敏度高、适用范围广的特点。
送样方式
1.配体蛋白(标记芯片),样品需要干冰寄送
纯度大于90%
浓度大于0.1ug/ul(尽可能高),提供10ug左右。
需提供配体蛋白的等电点
配体蛋白缓冲液尽量避免Tris等带有氨基基团的试剂
避免颗粒或絮状沉淀
2.分析物(流动相),寄送温度和方式根据小分子药物或核酸的保存方式确定
纯度大于80%
浓度大于0.1ug/ul(尽可能高),提供冻干粉最好。根据样本情况,至少0.5mg左右。
提供准确分子量和浓度以及溶剂成分
溶剂最好不能含有有机化合物,如:DMSO 甘油。如果一定需要加入有机溶剂,就尽量提供高浓度的分析物,通过稀释可以降低其含量比。
服务周期
一般为样品接收后的3-4周,具体实验周期及送样时间请与科学指南针工作人员沟通确认,谢谢!
交付内容
检测报告(含测试流程,仪器型号等),结合速率常数(Ka),解离速率常数(Kd),解离平衡常数(KD),也叫亲和力常数。结果反馈请在测试完成一周内反馈给科奥工作人员。
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